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如何快速预测重组质粒是否可以表达外源基因?

作者:admin 浏览量:3 来源:本站 时间:2025-08-11 07:59:08

信息摘要:

1.Snapgene进行聚合酶链式反应PCR。(1)打开重组质粒图谱。在菜单栏中,点击“行动”、“聚合酶链反应(PCR)”。(2)然后,在聚合酶链反应(PCR)中,选择合适的正向引物和反向引物,进行扩增。(3)检查扩增产物是否是目的基因表达的氨基酸序列。一般情况,检查前十个氨基酸和后十个氨基酸即可。如果出现易码等,都可以采用

1.Snapgene进行聚合酶链式反应PCR。

(1)打开重组质粒图谱。在菜单栏中,点击“行动”、“聚合酶链反应(PCR)”。

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(2)然后,在聚合酶链反应(PCR)中,选择合适的正向引物和反向引物,进行扩增。

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(3)检查扩增产物是否是目的基因表达的氨基酸序列。一般情况,检查前十个氨基酸和后十个氨基酸即可。如果出现易码等,都可以采用这种方法验证。

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2.Snapgene进行预测琼脂糖凝胶电泳

(1)打开重组质粒图谱。在菜单栏中,点击“工具”、“模拟琼脂糖凝胶”。

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(2)输入酶切位点。在左侧琼脂糖凝胶电泳图片上就显示出相应的片段。

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(3)可以更改泳道数量和缓冲液等。

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(4)也可以更改MW。凡是蓝色的字体都可以点击并进行修改。

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(5)也可以直接选择重组质粒后进行PCR扩增,扩增后的产物片段也会直接显示到琼脂糖凝胶图片上。

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(6)其中,鼠标靠近电泳条带,会显示属于哪个片段,大小多少。

(7)在凝胶处,右键,选择“输出凝胶图像或复制凝胶图像”。

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可以选择凝胶格式。

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(8)打开凝胶图像,检查。

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