ox-LDL诱导
使用50 μg/mL ox-LDL刺激RAW264.7或血管平滑肌细胞VSMCs细胞48 h；
炎症因子诱导：使用IL-1β（10-50 ng/mL）和TNF-α（10-100 ng/mL）刺激RAW264.7或VSMCs 48-72 h。
一 小鼠模型构建方法
1. 高脂饮食诱导法
原理：通过长期饲喂高胆固醇、高饱和脂肪酸饮食，诱导血脂异常，促进脂质在血管壁沉积。
常用动物
ApoE⁻/⁻小鼠：载脂蛋白E基因敲除，无法清除血液中残余脂蛋白，易自发形成动脉粥样硬化斑块。
LDLr⁻/⁻小鼠：低密度脂蛋白受体缺陷，对饮食诱导的血脂升高更敏感。
兔：对胆固醇敏感，斑块形成快，但需高脂饮食（含1%-2%胆固醇）持续8-12周。
猪：与人类血管结构相似，但成本高，周期长（需6-12个月）。
操作要点
饲料配方：通常含15%-20%脂肪、0.5%-2%胆固醇（小鼠）或1%-2%胆固醇（兔）。
诱导周期：小鼠4-16周，兔8-12周，猪6-12个月。
2.基因编辑技术
原理：通过敲除或过表达特定基因（如ApoE、LDLr、PCSK9），模拟人类遗传性高脂血症。
常用模型
ApoE⁻/⁻小鼠：最经典模型，斑块形成率高，适用于研究脂质代谢与炎症。
LDLr⁻/⁻小鼠：需高脂饮食辅助，斑块更稳定。
PCSK9过表达小鼠：通过腺病毒注射或转基因技术，模拟家族性高胆固醇血症。
3.血管损伤辅助法
原理：结合高脂饮食，通过机械损伤（如球囊损伤、导线剥脱）或化学损伤（如氯化铁）破坏血管内皮，加速斑块形成。
适用动物：兔、大鼠、猪。
操作要点
损伤部位：颈动脉、腹主动脉或髂动脉。
损伤后高脂饮食喂养2-8周。
二、常用检测指标
1.血脂水平检测
总胆固醇（TC）：反映整体脂质代谢状态
低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）：核心致病因子，与斑块形成正相关。
高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）：保护性因子，促进胆固醇逆向转运。
甘油三酯（TG）：与代谢综合征相关。
2.斑块形态学分析
组织病理学
HE染色：观察斑块大小、纤维帽厚度、脂质核心比例。
Masson染色：评估纤维帽中胶原含量及斑块稳定性。
油红O染色：定量脂质沉积面积。
影像学技术
超声成像：无创监测斑块体积及血流动力学变化。
Micro-CT：高分辨率显示血管钙化。
光学相干断层扫描（OCT）：实时观察斑块内部结构。
2.炎症与免疫指标
细胞因子：IL-6、TNF-α、MCP-1（反映炎症反应强度）。
免疫细胞浸润：CD68⁺巨噬细胞、CD3⁺T细胞计数（斑块不稳定性标志）。
氧化应激标志物：MDA（丙二醛）、SOD（超氧化物歧化酶）。
3.分子生物学指标
基因表达
炎症相关基因：ICAM-1、VCAM-1（黏附分子）、MMP-9（基质金属蛋白酶）。
脂质代谢基因：ABCA1、ABCG1（胆固醇转运蛋白）、SREBP-2（胆固醇合成调控因子）。
蛋白质检测
Western blot/ELISA：定量检测LOX-1（氧化型LDL受体）、NLRP3炎症小体等关键蛋白。
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