1. 单色荧光染色图片处理
Step.1 首先我们要做的就是打开Image J软件。打开以后看看出现的界面,出现图示界面表明软件打开成功。

Step.2 导入我们实验中产生的荧光染色图片,图片的格式可以是png等多种格式。找到荧光染色图片所在的路径,在所在的文件夹中找到你所需要处理的荧光染色图片。

本次以这篇SCI中的免疫荧光图片为本次处理的示例照片


Step. 3 单色荧光染色图片处理。
操作过程中依次按照以下顺序进行软件操作
Image -> Adjust -> Brightness/Contrast -> 调整Maximum或Minimum的阈值(通常只处理Maximum就可以) -> Apply -> File -> Save/Save as

调整结果:调整完以后的LC3, ATPB以及DAPI图。



2. 未Merge过荧光染色图片处理
Step. 1 打开软件的merge图片处理功能。
可以依次按照以下顺序对多种单个荧光染色免疫荧光图片进行操作 Image -> Color -> Merge Channels

Step. 2 Merge绿色,蓝色和红色三张免疫荧光染色图片。
示例中merge的照片是绿色,蓝色和红色,因此将处理过的“绿色LC3”,“红色AYPB”图片和“蓝色DAPI”图片分别放到相应颜色的通道中,勾选“Keep source images”,点“OK”就可完成merge。PS:完成merge的图片还需要进行保存(Save/Save as)
多色Merge之后的结果:

PS:调整完阈值以后切记、切记、切记点击Apply



