恶性胸腔积液(malignant pleural effusion, MPE)是恶性肿瘤转移至胸膜腔或直接侵犯胸膜所致的渗出性液体积聚,为肿瘤晚期常见并发症,亦是晚期肺癌患者的主要死亡原因之一。由于临床治疗效果有限,建立恶性胸腔积液动物模型,对探索其发病机制及开展临床前期药物研发具有重要意义。
现有研究采用表达增强型绿色荧光蛋白的Lewis肺癌细胞(LLC-EGFP)经胸膜腔接种法,成功构建裸鼠恶性胸腔积液模型。通过小动物活体荧光成像系统动态监测肿瘤生长,可系统分析其生物学特性,为肺癌胸膜转移机制研究及新型治疗策略开发提供了可靠的实验平台 [1]。
1、实验动物:BALB/c( nu/nu)裸鼠 ,4-6周龄,雄性,SPF级。
2、实验分组
① 空白组
② 模型组
3、模型建立
将LLC-EGFP细胞悬浮于PBS中,调整细胞浓度为5×105/50μL。麻醉小鼠仰卧固定,消毒心前区皮肤,于胸骨柄右侧0.5 cm处做一纵行切除,切口长0.5 cm,分离皮肤及皮下筋膜,露出肋间肌肉,棉签压迫止血。微量移液器抽吸50 μL细胞悬液,于显微镜下避开血管,经肋间隙注入胸膜腔,针尖注入深度约3 mm-5 mm,以免刺破脏层胸膜或者伤及肺部。注射完毕后缝合伤口,酒精棉球消毒,待裸鼠苏醒后安放于原饲养笼内,给予充分饲养和饮水。
4、模型检测
① 活体荧光成像观察肿瘤生长

② 胸部CT扫描

5、模型特点
(1)活体成像检测结果显示:接种后第4天,荧光体视镜下可发现胸膜上有绿色荧光,成瘤率100%;随接种时间延长,肿瘤体积逐渐增加,肿瘤侵及纵隔和肺门淋巴结、对侧胸膜、心包,转移率分别为87%、 73%和20%(图1)。
(2)胸部CT扫描结果显示:第7天、第14天和第21天成胸水率分别为13%、 46%和53%(图2)。
参考文献:
[1]马兴群,孙宇,王守巨,等.EGFP标记的Lewis肺癌细胞构建裸鼠恶性胸腔积液模型[J].中国肺癌杂志,2012,15(06):317-323.
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