1.稀释后，铺胶会不会凝固？怎么样才能确定铺胶完成?
1:8稀释时，稀释液不会凝固，会形成一层凝胶薄膜。显微镜下可看见黑点旁边类似黄色圆点。如下图所示 （批次1623zw，无酚红）
图1. 铺了胶与未铺胶对比图
图2. 显微镜下未铺胶
图3.显微镜下铺胶后
2.怎么避免铺胶时产生气泡？若产生气泡要怎么处理？
铺胶时若产生气泡，可用枪头戳破，铺胶以后左右摇摆使胶铺平。
3.铺细胞前，如果要液体穿过小室进入下室会对实验产生什么影响？要怎么处理？
基底膜水化后，检查是否有液体穿过小室进入到下室中，若没有，则可以接种细胞；若有，可能实验结果会不准确。
4.怎么样判断消化细胞完成？
加胰酶消化后至显微镜观察，若细胞变圆，则消化完成，最终用有血清培养基终止消化后。
5.小室放入24孔板时，产生气泡，是否对实验有影响？
下层培养液和小室间常会有气泡产生，一旦产生气泡，下层培养液的趋化作用就减弱甚至消失了，在种板的时候要特别留心，一旦出现气泡，要将小室提起，去除气泡，再将小室放进培养板。
6.侵袭时间要多久合适？
侵袭时间24-48h，可以参考迁移实验，不能时间太久，会被质疑细胞增殖。具体时间需要根据细胞的转移能力来判断。
7.基质胶的浓度稀释比例是不是一定要1：8？
不一定，稀释的比例需要进行摸索，选择一个细胞穿透适中的比例即可。
8.接种细胞的数量多少最佳？
具体实验时采用密度要自己摸索，因为不同细胞，其侵袭能力是不同的。个人经验，细胞量过多，穿过膜的细胞会过多过快，如果最后用计数法统计结果的话将难以计数；而过少的话，可能还没到检测的时间点，所有的细胞都已穿过，因此最少也要保证在收样的时候，上室内还要有一定量的细胞存在。
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